【佳學(xué)基因檢測(cè)】Meesmann 角膜營(yíng)養(yǎng)不良和假單側(cè)格狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良同時(shí)存在怎么做基因檢測(cè)？

眼科遺傳病基因檢測(cè)導(dǎo)讀：

視光學(xué)異?；驒z測(cè)機(jī)構(gòu)的科譜文章中會(huì)介紹Meesmann 角膜營(yíng)養(yǎng)不良 (MECD) 是一種罕見(jiàn)的累及角膜上皮的疾病，其特征是存在大量小的圓形上皮內(nèi)微囊，廣泛分布于瞼間區(qū)并延伸至角膜緣。雖然有些人可能沒(méi)有癥狀，但Meesmann 角膜營(yíng)養(yǎng)不良 (MECD) 通常與反復(fù)性角膜糜爛有關(guān)，角膜糜爛會(huì)導(dǎo)致眩光、畏光、異物感、流淚、隱形眼鏡不耐受以及繼發(fā)于上皮下瘢痕形成的視力下降。這種病理學(xué)與角膜特異性角蛋白 K3 和 K12 基因 [分別為 KRT3（MECD2，OMIM #618767）和 KRT12（MECD1，OMIM #122100）] 的突變有關(guān)，并作為具有各不相同的臨床癥狀的常染色體顯性特征遺傳。角蛋白是中間絲蛋白，在上皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形成致密的纖維支架。具體而言，KRT3 編碼 II 型中間絲，其改變預(yù)計(jì)會(huì)對(duì) K3/K12 異二聚體復(fù)合物產(chǎn)生負(fù)面影響，導(dǎo)致上皮細(xì)胞異常脆弱。迄今為止，在 KRT3 中總共發(fā)現(xiàn)了 4 種不同的致病突變，它們都與Meesmann 角膜營(yíng)養(yǎng)不良 (MECD) 相關(guān)。

另一方面，格子狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良 (LCD) 是線性基質(zhì)淀粉樣變性的一種遺傳形式，其特征是細(xì)的分支折射線和/或通常在先進(jìn)個(gè)十年末出現(xiàn)的上皮下白色卵圓形點(diǎn)。癥狀通常包括反復(fù)性角膜糜爛和視力障礙。報(bào)告的 LCD 病例表現(xiàn)出常染色體顯性遺傳模式，并且與轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β 誘導(dǎo) (TGFBI) 和凝溶膠蛋白 (GSN) 基因的錯(cuò)義突變有關(guān)。

在Meesmann 角膜營(yíng)養(yǎng)不良和假單側(cè)格狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良同時(shí)存在怎么做基因檢測(cè)，介紹了一名患者的臨床和分子研究，該患者攜帶新的 KRT3 突變，并伴有家族性Meesmann 角膜營(yíng)養(yǎng)不良 (MECD) 和假單側(cè)格子狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良 (LCD) ，這是眼科疾病基因解碼報(bào)告的具有多種疾病表征的基因原因可以明確鑒定的病例。
 

眼科疾病的致病基因鑒定基因解碼基因檢測(cè)結(jié)果

一名 56 歲的河南婦女因疼痛刺激和雙眼 (OU) 視力逐漸喪失而到佳學(xué)基因合作三甲醫(yī)院眼科就診?；颊叩难鄄坎∈凤@著為自兒童時(shí)期的畏光和超過(guò) 17 年的反復(fù)性角膜糜爛。賊佳矯正視力右眼 (OD) 為 20/400，左眼 (OS) 為 20/30。裂隙燈檢查顯示雙眼上皮有多個(gè)中央微小囊腫，僅右角膜有格狀病變，由前角膜基質(zhì)中的線狀細(xì)分支混濁組成。 OD 還呈現(xiàn)位于角膜下部的上皮下和前基質(zhì)纖維化。還可以觀察到 OU 中的角膜后鱷魚(yú)皮鯊魚(yú)綠變性。這些發(fā)現(xiàn)與 MECD 和單邊 LCD 兼容。進(jìn)行總血清蛋白、血清蛋白譜和免疫電泳以排除臨床上無(wú)癥狀的副蛋白血癥或其他血液學(xué)惡液質(zhì)。獲得的血清學(xué)結(jié)果在正常范圍內(nèi)。至于家族史，她的父親被診斷出患有Meesmann 角膜營(yíng)養(yǎng)不良 (MECD) ，但沒(méi)有觀察到格子線，而根據(jù)眼科檢查，母親和姐姐沒(méi)有任何角膜改變。

臨床檢查結(jié)果

A，從患者的右眼和左眼（分別為 OD 和 OS）獲得的裂隙燈逆光圖像顯示多個(gè)微小的上皮微囊，其延伸至角膜緣，并且在瞼間區(qū)域中數(shù)量賊多，周圍上皮清晰。此外，在 OD（左圖）中也觀察到中央上皮下疤痕和蜘蛛狀分支模式中的多條格線局限于前中間質(zhì)。 B，患者（個(gè)體II：1）的家系顯示了具有MECD表型的KRT3基因中的變異體c.1492G> A的共分離分析。

眼科復(fù)雜疾病的致病基因鑒定基因檢測(cè)分析

為了確定疾病的分子原因，對(duì)患者的 DNA 進(jìn)行了全外顯子組測(cè)序。根據(jù)家族史和報(bào)告的病例，分析了四種不同的基因（GSN、KRT3、KRT12 和 TGFBI），認(rèn)為常染色體顯性遺傳是賊可能的遺傳模式。只有KRT3基因中的雜合核苷酸變異c.1492G>A（氨基酸變化p.Glu498Lys）被鑒定為推定的候選突變，通過(guò)Sanger測(cè)序進(jìn)一步證實(shí)。所有計(jì)算機(jī)致病性預(yù)測(cè)因子都表明該變體會(huì)產(chǎn)生有害影響，而 PhastCons 和 PhyloP 程序確定該變化會(huì)影響高度保守的核苷酸和氨基酸位置。該突變未在 137 名對(duì)照個(gè)體的內(nèi)部隊(duì)列中發(fā)現(xiàn)，也未在人類多態(tài)性 (dbSNP) 和突變數(shù)據(jù)庫(kù)（HGMD 和 Uniprot）中發(fā)現(xiàn)。此外，對(duì)同樣受Meesmann 角膜營(yíng)養(yǎng)不良 (MECD) 影響的患者父親的 DNA 進(jìn)行 Sanger 測(cè)序，確定了相同的雜合突變，進(jìn)一步證實(shí)了 KRT3 中 c.1492G>A 變異與家族性 MECD 表型的共分離。

基因解碼師對(duì)基因檢測(cè)結(jié)果的病理學(xué)分析

眼科多疾病并存的基因檢測(cè)報(bào)告了一例共存的家族性Meesmann 角膜營(yíng)養(yǎng)不良 (MECD) 患者的假單側(cè) LCD。之前與這 2 種表型相關(guān)的所有基因的分子篩選揭示了 KRT3 中的一種新的錯(cuò)義致病變異（c.1492G>A，p.Glu498Lys），與形態(tài)學(xué)和臨床 MECD 發(fā)現(xiàn)相關(guān)。在這方面，已經(jīng)在患有 MECD 的家族中報(bào)道了改變相同氨基酸殘基的類似錯(cuò)義突變（c.1493A>T，p.Glu498Val）。這些發(fā)現(xiàn)強(qiáng)化了已鑒定的 KRT3 變體 c.1492G>A 作為佳學(xué)基因案例中家族中Meesmann 角膜營(yíng)養(yǎng)不良 (MECD) 的分子原因，也以常染色體顯性遺傳模式遺傳。

關(guān)于患者獨(dú)特的假單側(cè)格子狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良 (LCD) ，值得一提的是，角膜營(yíng)養(yǎng)不良（包括 LCD）通常是雙側(cè)和對(duì)稱的疾病，盡管也有一些單側(cè)或明顯不對(duì)稱的病例報(bào)道。雖然偶爾會(huì)引起格子樣變化由于繼發(fā)于 MECD 的反復(fù)性上皮損傷，或由于副蛋白血癥性角膜病變，正常的血清學(xué)檢查結(jié)果和患者 OD 中注意到的經(jīng)典格子狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良 (LCD) 病變表明這可能是該疾病的獨(dú)特單側(cè)變異。然而，應(yīng)考慮對(duì)患者進(jìn)行血液學(xué)隨訪，以確保格子表型不會(huì)在全身受累前出現(xiàn)。關(guān)于基因診斷，GSN和TGFBI篩查未發(fā)現(xiàn)本例患者有任何致病突變。因此，觀察到的角膜表型是假單側(cè)格子狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良 (LCD) ，因?yàn)槿狈χС值倪z傳證據(jù)，盡管一些作者也報(bào)道了臨床診斷為格子狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良 (LCD) 的患者沒(méi)有分子原因。在這方面，重要的是要強(qiáng)調(diào)在患者身上觀察到的晶格線似乎不是軸向分布的。這一特征，加上格線的單側(cè)性質(zhì)和父親的缺失，都反對(duì)遺傳性角膜營(yíng)養(yǎng)不良。無(wú)論如何，已識(shí)別的 KRT3 突變 c.1492G>A 似乎與這種獨(dú)特的格子狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良 (LCD) 表型無(wú)關(guān)，因?yàn)楦赣H也有相同的突變，但尚未表現(xiàn)出這種疾病。因此，目前的臨床數(shù)據(jù)無(wú)法闡明目前的聯(lián)合角膜表型是否是共同致病機(jī)制或相鄰遺傳缺陷的表現(xiàn)，或者只是 2 種罕見(jiàn)疾病之間的巧合，如先前在其他類似事件中報(bào)道的那樣，需要進(jìn)一步的功能分析執(zhí)行。