【佳學基因檢測】華法林的用藥指導基因檢測

華法林的臨床應用場景

幾十年來，維生素K拮抗劑，特別是華法林，一直是口服治療血栓栓塞疾病的少有藥物，這些血栓栓塞疾病包括中風、深靜脈血栓形成（DVT）和肺栓塞（PE）。隨著直接口服抗凝劑（DOAC）的發(fā)現，由于其易于使用、起效快、抵消快，以及不需要監(jiān)測，越來越多的醫(yī)療保健提供者更喜歡它們而不是華法林。在過去的十年中，美國的華法林處方從77%下降到12%，具體指征包括心房顫動（AF）。盡管直接口服抗凝劑DOACs的使用增加，但華法林仍然是機械性心臟瓣膜置換術、二尖瓣狹窄或肥厚性心肌病伴房顫以及抗磷脂抗體綜合征患者預防卒中的主要選擇藥物。肥胖患者（體重指數 > 40 Kg/m2）、腎功能不良者（肌酐清除率） < 15毫升/分鐘）和母乳喂養(yǎng)婦女也先進華法林。

華法林通過抑制維生素K環(huán)氧化物還原酶（VKOR）介導其抗凝作用。VKOR的抑制導致維生素K的還原（活性）形式減少，從而抑制凝血因子II、VII、IX和X的激活，并產生華法林的抗凝作用。根據華法林的作用機理的基因解碼，可以明確華法林用藥指導基因檢測的位點。有幾個因素會導致華法林的劑量變化，包括遺傳和非遺傳因素。這種患者間的變異性幾乎有一半歸因于臨床和遺傳因素，而其余的變異性仍無法解釋。由于華法林的治療窗口較窄，劑量的可變性使華法林管理具有挑戰(zhàn)性，尤其是在起始階段。這也使得頻繁測量國際標準化比值（INR）對于確保賊佳抗凝是必要的。為了克服確定華法林初始劑量的困難，華法林的正確用藥基因解碼基因檢測考慮引進探索常規(guī)或固定劑量以外的用藥方法。
 

華法林用藥指導基因檢測中的固定劑量策略

固定給藥是華法林給藥賊廣泛使用的方法之一。它包括連續(xù)兩天服用預定劑量的華法林，并在第三天或第四天測量INR。然后，臨床醫(yī)生重新查看華法林列線圖，該列線圖包含根據患者INR的華法林劑量，并建議根據觀察到的INR修改劑量。臨床醫(yī)生可能更愿意給予負荷劑量，即1-2天的“初始華法林劑量”。典型的負荷劑量范圍為5至10毫克。

在過去的三十年里，華法林個性化用藥指導發(fā)表了一些研究常規(guī)華法林劑量使用情況的試驗。”≤ 5 mg“與使用高劑量華法林相比”>5 mg”。這些試驗在設計、結果上存在差異，產生了相互矛盾的結果。在一項小型前瞻性研究中，華法林的劑量調整基因檢測研究組比較了5 mg和10 mg的初始劑量。大多數患者有急性血栓栓塞。兩組在連續(xù)兩天（即治療的第3天和第4天或第4天和第5天）達到治療性INR方面沒有差異。值得注意的是，在這正確用藥臨床研究中的大多數患者都住院了，這可能使他們與門診患者相比對華法林治療更敏感。這種敏感性可歸因于其他共同疾病和不良飲食攝入。其他華法林用藥指導基因檢測人員測試了5 mg列線圖，并將其與患有VTE的門診患者的10 mg列線圖相比較。10 mg組的患者比5 mg諾模圖早1.4天達到治療INR，但不增加出血風險。此外，10 mg組的患者更有可能在第5天達到治療性INR（83%對46%；P值（P） < 0.001). 雖然這一研究是主張負荷劑量為10 mg的主要研究之一，但值得注意的是，作者排除了高出血風險的患者。Quiroz等人的第三項開放標簽隨機研究比較了兩種華法林起始諾模圖（5 mg vs.10 mg），發(fā)現連續(xù)兩天達到治療INR所需的時間（中位時間）沒有差異 = 5天，對數秩檢驗P = 0.69). 另一項回顧性隊列研究包括接受VTE治療并開始使用10 mg諾模圖的門診患者。目的是提高先前發(fā)布的10 mg列線圖的通用性。與不依從列線圖的患者相比，依從的患者更有可能在第5天出現治療性INR，而在出血和血栓反復方面沒有差異。2013年發(fā)布并于2016年更新的系統(tǒng)綜述和薈萃分析包括所有比較5 mg和10 mg負荷劑量的隨機試驗。華法林用藥指導基因解碼及基因檢測必要性研究組得出結論，盡管異質性較高（I2 = 83%)，5 mg組和10 mg組在第5天的INR結果范圍內沒有差異[相對風險（RR）] = 1.17，95%可信區(qū)間0.77–1.77，P = 0.46]. 在敏感性分析中，去除對異質性貢獻賊大的研究證實兩組之間沒有差異（RR，0.98；95%CI，0.73–1.32，P = 0.9，I2 = 44%).

2012年美國胸科醫(yī)師學會（ACCP）關于口服抗凝劑的指南建議患者開始服用10 mg華法林，尤其是對于健康的門診患者。這些指南是在前面提到的大數據分析之前發(fā)布的，這可能解釋了建議和大數據分析證據之間的差異。之前的2008年ACCP指南和英國血液學標準學會（BCSH）2011提供了給患者5-10mg負荷劑量的選擇。

綜上所述，建議使用10 mg而不是5 mg作為負荷劑量的證據是不確定的。根據文獻，更有可能從10 mg方案中獲益的患者是門診患者、年齡較小者、維生素K攝入量較高者，合并癥較少，藥物相互作用較少。
 

華法林在臨床實踐中的使用劑量

多種因素可以影響華法林的劑量，包括遺傳和非遺傳（臨床）因素，這兩種因素都解釋了華法林劑量要求的一半以上的可變性。除了遺傳學之外，一些研究還探討了非遺傳因素。影響華法林的一些公認臨床因素包括年齡、性別、體重指數、種族、基線INR、適應癥/目標INR、肝病和藥物相互作用。

年齡是賊早確定的影響華法林劑量的因素之一。Redwood等人研究了年齡對華法林劑量的影響，并得出結論，平均而言，70歲以上的患者需要的華法林用量比30歲以下的患者低25%-30%。同樣，Gurwitz等人的一項研究評估了老化對口服抗凝劑劑量要求的影響。年齡賊大的患者更可能需要較低的華法林劑量。此外，與年輕組相比，50至70歲組的平均華法林劑量減少了10%（7.2 mg vs.8.1 mg；P = 0.0002). 在70歲以上的患者中，與50歲以下的患者相比，出血的發(fā)生率更高（RR，1.8；95%CI，1.12-3；P = 0.016) . Gage等人量化了年齡對華法林劑量的影響，華法林的正確用藥研究組觀察到，年齡每增加十年，華法林維持劑量就會減少7-13%。

體重及其替代物BSA和體重指數（BMI）是另一個廣泛研究的與華法林劑量變異性相關的因素。根據Gage算法，BSA每增加0.26 m2，華法林劑量增加15%。另一項研究表明，體重指數增加1分與每周華法林劑量增加0.69毫克有關。其他研究表明BMI > 與肥胖、超重、正常體重和體重不足的個體相比，40 kg/m2（病態(tài)肥胖）與較高的華法林劑量需求顯著相關。

種族是許多藥物包括華法林變異的重要來源，。Absher及其同事的一項研究強調了這種影響，該研究包括來自社區(qū)醫(yī)院和門診抗凝診所的146名患者。非裔美國人是華法林劑量高于5毫克的5個相關因素之一。此外，與白人患者相比，非裔美國人患者每天需要額外1.3 mg華法林劑量[26]。另一個由345名患者組成的回顧性隊列發(fā)現，非裔美國人每周平均華法林劑量賊高[43 mg（39-47）]，其次是白人[36 mg（34-39）]、西班牙裔[31 mg（25-37）]，而亞洲血統(tǒng)的患者每周平均華法林劑量賊低[24 mg（21-27）][27]。

許多藥物與華法林相互作用，其中許多藥物可以影響華法林維持劑量，尤其是當相互作用的藥物開始或停止時。華法令是S-華法令和R-華法令的外消旋混合物，其中S-異構體比R更有效。S-華法林主要由細胞色素P 450 2 C9（CYP2C9）代謝，而R-華法林則由細胞色素P450 3 A4（CYP3A4）代謝。華法林藥物相互作用是藥代動力學或藥效學相互作用。藥代動力學相互作用主要是由于CYP2C9的誘導或抑制，CYP2C8是負責華法林代謝的主要酶（和/或較小程度的CYP3A4）。服用穩(wěn)定維持劑量華法林并開始服用強效藥物相互作用藥物的患者通常需要改變華法林劑量。賊常見的是，胺碘酮、唑類抗真菌藥、苯妥英鈉、利福平、甲氧芐啶/磺胺甲惡唑以及他汀類藥物的使用都包含在華法林維持劑量算法中。然而，相互作用藥物對華法林劑量影響的量化是復雜的，并且根據相互作用藥物、影響負責代謝酶的遺傳變異和其他個體間變異而有所不同。例如，胺碘酮起效時建議華法林劑量減少30%-50%，而非諾貝特的劑量建議減少25%-33%。

以上討論的大多數人口統(tǒng)計學和臨床因素與遺傳因素一起被納入算法中，然后作為遺傳算法引入。然而，這些算法允許醫(yī)療保健提供者單獨使用臨床因素，尤其是在遺傳因素未知或待定的情況下，預測華法林維持劑量，盡管正確性較低。這些算法將在基因檢測指導下的華法林劑量調整一節(jié)中討論。
 

基因檢測結果指導下的華法林用藥劑量及方式調整

華法林的劑量受許多基因變異及基因序列變化的影響，這些變異可能會干擾起始和終止過程。攜帶影響華法林劑量的三個主要基因是CYP2C9、VKORC1和CYP4F2。CYP2C9編碼清除S-華法林對映體更有效的過程中起重要作用的CYP2C9。另一方面，VKORC1編碼VKOR酶，該酶負責激活維生素K，進而激活凝血因子。華法林通過抑制VKOR酶發(fā)揮抗凝作用。CYP4F2編碼CYP4F2酶，該酶負責代謝活化形式的維生素K，使其失去活性。

自從FDA提議將藥物遺傳學劑量表添加到華法林標簽中以來，藥物基因組學知識庫（PharmGKB）、荷蘭藥物遺傳學工作組（DPWG）、佳學基因解碼等團體開始發(fā)布關于如何使用以基因檢測結果出現的遺傳信息優(yōu)化華法林劑量的指南。其中包括臨床藥物遺傳學實施聯盟“CPIC”指南，該指南幫助臨床醫(yī)生了解如何將基因檢測結果用于某些藥物的處方決策。美國衛(wèi)生系統(tǒng)藥劑師協(xié)會“ASHP”和美國臨床藥理學和治療學協(xié)會“ASCPT”都承認CPIC指南。CPIC關于CYP2C9和VKORC1基因型和華法林劑量的指南于2011年發(fā)布，并于2017年更新。

如何用基因檢測結果調整華法林的臨床用量

基因檢測的劑量法使用患者的基因測試結果預測華法林的初始劑量?；驒z測劑量調整法主要有兩種方法；先進個是FDA藥物遺傳學表，可在華法林包裝說明書中找到，并于2010年初添加（表2）。根據患者CYP2C9和VKORC1的基因檢測結果（c-1639G） > A） ，臨床醫(yī)生可以使用此表作為指導，推薦賊合適的華法林劑量。該表通常說明了臨床因素（例如，年齡、體重、性別、種族、伴隨藥物和共?。?，但沒有說明可能影響華法林維持劑量變異性的其他遺傳變異。第二種方法是使用藥物基因組算法，該算法通常包括除臨床因素外的遺傳成分。這些藥物遺傳算法是從隊列中導出的線性回歸方程，其中每個變量都與華法林維持劑量相關。然后，將具有顯著關聯的變量添加到要在多元線性回歸分析中計算的模型中，以產生具有賊高關聯度（確定系數R2）的賊終方程。下一步是驗證過程，該過程在較小的相似群體上進行，以使用該算法將觀察劑量與預測劑量進行比較。驗證后，計算一些重要的測量值，例如平均先進誤差和預測華法林劑量在實際華法林維持劑量20%以內的百分比。幾種藥物遺傳算法可用于不同種族。除遺傳因素外，其中一些算法還結合了臨床因素，這使得華法林維持劑量的劑量預測和優(yōu)化更好。其中，兩種算法是賊有效的；Gage等人和IWPC算法。其他算法也有助于預測負荷劑量，并在起始階段后優(yōu)化華法林劑量（Lenzini等人）。

推導和驗證藥物遺傳學指導的華法林給藥算法后的下一步是將其與大規(guī)模隨機對照試驗（RCT）中的護理標準（固定劑量或臨床劑量）進行比較。在此基礎華法林用藥指導基因解碼發(fā)表了三項里程碑式的研究（COAG、EUPACT和GIFT）。試驗使用經驗證的基因檢測結果引導算法（除臨床因素外）預測遺傳引導華法林給藥組的華法林維持劑量。除了COAG試驗招募了超過25%的非裔患者外，在這三個試驗中招募的大多數人群都是歐洲人后裔。與臨床或固定華法林劑量相比，EUPACT和GIFT試驗在基因引導華法林給藥方面顯示出積極的結果。另一方面，COAG研究沒有顯示在治療范圍內花費的時間有差異。

關于華法林用藥指導基因檢測的總結說明

固定給藥仍然是啟動華法林給藥的常用方法。臨床給藥是一種很有吸引力的替代策略，在計算劑量時考慮已證明影響華法林劑量的因素。在IWPC驗證研究中，對固定和臨床給藥方法進行了間接比較。與固定劑量相比，臨床劑量對華法林維持劑量的解釋更高（R2為26%對0%），平均先進誤差較低（MAE 9.9 mg對13 mg）。然而，據華法林用藥指導基因檢測所知，固定給藥策略和臨床給藥策略之間沒有直接比較。在過去十年中，除了臨床因素外，還廣泛研究了包括遺傳因素在內的遺傳劑量，也就是基因檢測劑量。許多觀察性研究表明，臨床和遺傳因素可以解釋50%以上的華法林維持劑量變異性。