【佳學(xué)基因檢測】基因檢測測序技術(shù)金標準：Sanger法一代測序

基因測序技術(shù)始于1977年，sanger發(fā)明的DNA雙脫氧末端終止測序法拉開了序幕。Sanger在1958年和1980年因為胰島素測序和DNA測序而兩度獲得諾貝爾化學(xué)獎，是第四位兩度獲得諾貝爾獎以及唯一獲得兩次諾貝爾化學(xué)獎的人。

圖片

Sanger測序

Sanger測序采用四個雙脫氧核糖核酸(ddNTP)加入到正在合成的鏈上，由于雙脫氧核糖核酸少了一個氧原子，一旦被加入到DNA鏈上，反應(yīng)即終止。

通過構(gòu)建四個反應(yīng)體系，加入AGCT四種雙脫氧核糖核酸，同時調(diào)節(jié)脫氧核糖核酸(dNTP)和ddNTP的相對濃度，可以使反應(yīng)擴增得到幾百至上千堿基的終止產(chǎn)物。

隨后通過凝膠電泳對產(chǎn)物進行分離，分為四個泳道，每個泳道對應(yīng)一種堿基，然后讀取條帶顯影結(jié)果。

圖片

該方法因正確率高，被稱為基因檢測的金標準，但是耗時長，成本高。

2001年人類基因組計劃就是采用sanger測序完成的，從1990年人類基因組計劃建立開始，全球的科學(xué)家歷時11年耗資30億美元完成。

進入21世紀后，隨著物理及化學(xué)技術(shù)的發(fā)展，開始采用相同激發(fā)波長但不同發(fā)射波長的熒光集團來標記ddNTP，ATGC對應(yīng)不同的熒光基團產(chǎn)生不同顏色的光被計算機讀取，測序的速度和效率大大提高。

• 上一篇：【佳學(xué)基因檢測】分子診斷與基因檢測中的DNA恒溫擴增技術(shù)及等溫擴增技術(shù)
• 下一篇：【佳學(xué)基因檢測】將基因信息大眾化的第二代高通量測序技術(shù)（NGS)

• 收藏
• 挑錯
• 推薦
• 打印